动物营养Animal Nutrition 益生素对肉鸡生长性能、肠道菌群和 部分免疫性能的影响 焦喜兰 ,李瑞锋 ,梁宏德 ,尹清强 ,常 娟 ,杨玉荣 (1.河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;2.新乡市牧野区畜牧局,河南新乡453003) 摘要:试验研究益生素对肉鸡生长性能、肠道茵群和部分免疫性能的影响。选用AA肉仔鸡600只,分为3 个处理,每个处理5个重复,每个重复40只。3个处理分别为对照组(c)、抗生素组(T1)、益生素组(T2).试验期 49 d。结果表明,饲料中添加益生素可提高肉鸡的日增重,降低料重比,提高肠道中乳酸茵数量,降低大肠杆菌 数量,使免疫器官指数和免疫球蛋白数量增加。 关键词:益生素;肉鸡;免疫 中图分类号:¥816.7;¥814文献标志码:A文章编号:1001—0084(2013)03—0020—04 Effect of Probiotics on G rowth Performance,Bacteri u m i n I ntestine and Part I mmune Performance of Broilers JIAO Xilan ,LI Ruifeng ,LIANG Hongde’,YIN Qingqiang ,CHANG Juan ,YANG Yurong (1.College of Animal Husbandry and Veterinary Science,Henan Agricultural University,Zhengzhou 450002,China; 2.Xinxiang Muye District Bureau of Animal and Veterinary Medicine,Xinxiang 453003,Henan China) Abstract:To evaluative the effect of probiotics on growth performance,bacterium in intestine and part immune performance of broilers,six hundred AA broilers were randomly assigned to three groups,five repeat in each group, and 40 chickens for each repeat.Three groups were control group(C),antibiotics group(T1),probiotics group(T2). Trial period was 49 days.The results indicated that probiotics could increase daily weight gain,the number of Lacto— bacillus in intestine,index of immune organ and immunoglobulin,decrease feed conversion ratio and the number of Escherichia col in intestine. Key words:probiotic;broiler;immuue 益生菌是可通过改变菌群平衡而对生物个体施 加有利影响的活微生物,现已广泛应用于食品、医 药、畜牧和水产业,是人类和动物保健的理想选 的生长、肠道菌群和免疫方面的作用,为益生菌的 生产应用提供参考。 1材料和方法 1.1试验材料 择。益生菌具有增强动物免疫作用,促进动物健康 生长,提高畜牧养殖业的经济效益,降低抗生素等 药物的毒副作用,具有显著的社会生态效益”。I。本 研究在肉鸡饲料中添加益生菌制剂,研究其对肉鸡 收稿日期:2012-12—25 益生素为直接饲喂的活菌制剂,包括嗜酸乳杆 菌、干酪乳杆菌、纤维二糖乳杆菌及蜡样芽孢杆 菌、地衣芽孢杆菌,细菌总数≥8.OxlO cfu・g~。 基金项目:河南省农业成果转化项目(112201l10025) 作者简介:焦喜兰(197l一),女,河南南阳人,实验师,主要从事动物营养与病理研究。 通信作者:副教授,硕士生导师,Email:ya“gyu77l2@sina.corn。 20饲料博览2013年第3期 1.2试验动物与日粮 试验动物为AA肉仔鸡,基础饲粮为玉米一豆 粕型,参照中国鸡饲养标准(2004)按1~21 H龄、 22~49日龄2阶段饲粮进行配制,基础饲粮组成及 营养水平见表1。 表1基础饲粮组成及其营养水平 含量 含量 1-3周4~7周 1~3周4~7周 玉米 55.84 58.0O 粗蛋白/% 21.25 20.oo 大豆油4.46 5.84 代谢fl ̄/MJ・kg~ 12.38 12.77 大豆粕 31.o4 28.69 粗纤维/% 3.13 3.02 鱼粉4.50 3.61 粗脂肪/% 7.02 8.41 石粉 1.40 1.11 钙,% 1.O0 0.90 磷酸氢钙 1.05 1.26 有效磷/% 0.42 0.43 蛋氨酸 O.20 o.1O 食盐/% O.20 0.15 赖氨酸盐酸盐 o.15 o.12 赖氨酸,% 1.29 1.17 预混料 1.o 1.0O 蛋氨酸/% 0.58 0.45 食盐0.1O o.07 蛋氨酸+胱氨酸,% O.91 0.76 氯化胆碱 O.26 O.20 合计 1oo.oo lOO.0(3 注: 每千克Et粮含:铁100 mg,铜8 mg,锰90 mg,锌75 mg, 碘0.45mg,硒0.2mg,维生素A 6 000U,维生素D 32 000 U,维 生素E 20u,维生素K 32mg,硫胺素1-8mg,泛酸10mg,烟酸 32 mg,毗哆醇3.5 mg,生物素0.15 mg,叶酸O.55 mg,维生素Btz O.01mg。 营养水平为计算值。 1.3试验设计与饲养管理 1日龄AA肉鸡600只,随机分成3个处理,每 个处理200只,每个处理5个重复,每个重复40 只。对照组(C)饲喂基础日粮;抗生素组(T1)饲 喂基础H粮+阿维霉素2.5 mg・kg~;益生素组(T2) 饲喂基础日粮+益生素8.O×10。cfu・kg~。自由采 食、饮水、消毒,按常规程序进行防疫。 1.4检测指标及方法 1.4.1生长性能 每7 d空腹12 h称重各组肉鸡,记录各组鸡采 食量和剩料量,计算平均H采食量、日增重和料重 比,每天记录鸡发病和死亡情况。 1.4.2乳酸茵和大肠杆菌的测定 第49天从各组分别选取10只鸡,屠宰后分别 无污染地取空肠、盲肠内容物1 g放人9 mL无菌生 理盐水稀释容器内,l0倍稀释,振荡3 rain,取稀 释液1 mL于盛有9 mL灭菌生理盐水的容器内,依 Animal Nutrition动物营养 次进行逐级稀释,按照细菌平板计数法,从l0 开 始每个稀释倍数分别取稀释液0.2 mL涂抹在培养 基上,选取平板菌落数在200~300计数,测量乳酸 菌和大肠杆菌,换算成每克内容物所含菌落数 (cfu-g ),结果以对数(1g)平均值表示。 1.4_3免疫器官指数的测定 免疫器官指数的测定采用称重法,将鸡称重后 处死称量胸腺、脾脏、法氏囊湿重。免疫器官指数 计算见式1。 免疫器官指数=免疫器官重(g)/体重(kg)× 100% (1) 1.4.4免疫球蛋白的测定 翅静脉采血,3 000 rpm离心10 arin,分离血 清,IgG、IgM测定采用间接ELISA法,450 nm测 定OD值,抗体购于美国Southern Biotech公司。 1.5统计与分析 采用Excel 2003处理数据,DPS 7.05软件进行 数据统计分析,Duncan s法进行多重比较,结果以 “平均值±标准误”表示。 2结果与分析 2.1对肉鸡生产性能的影响 益生素对肉鸡生长性能的影响见表2。 表2益生素对肉鸡生长性能的影响 注:同行数据肩标不同小写字母者表示差异显著(JP<0.05),肩 标相同字母或不标者表示差异不显著(P>0.05)。下表同。 由表2可知,H增重Tl、T2组分别比c组提高 4.44%、7.86%。日采食量c组最低,T1组最高。 料重比T2组分别比C、T1组降低6.86%、6.37%, 并且死淘率T2组均低于其他组。表明益生素可以 在一定程度提高肉鸡的生产性能,降低死淘率,但 差异不显著(P>0.05)。 2.2对肉鸡肠道中乳酸菌和大肠杆菌数量的影响 益生素对肉鸡肠道中乳酸菌和大肠杆菌数量的 影响见表3。 由表3可知,空肠中乳酸菌数量T2组显著高 于C和T1组(尸<0.05),大肠杆菌数量Tl最低,c 2013年第3期饲料博览21 动物营养Animal Nutrition 组最高,T2组与其他两组无显著差异(P>0.05), 乳酸菌/大肠杆菌T2组最高,c组最低。盲肠中乳 酸菌T2组显著高于c和T1组(P<0.05),大肠杆菌 数量T2组显著高于C(P<O.05),但与T1组差异不 显著(P>0.05),乳酸菌/大肠杆菌T2最高,C最 低。表明添加饲料中添加益生素可提高乳酸菌数 量和乳酸菌/大肠杆菌。 表3益生素对肉鸡肠道中乳酸菌和大肠杆菌数量的影响 cfu・g一 种类 项目 乳酸菌 8.o1+0.35 7.58+(】.48 8.99+_0.52 空肠 大肠杆菌 8.26+0.72 7.25_+0.57 7.83+_0.64 乳酸菌/大肠杆菌 0.97 1.07 1.11 乳酸菌 8.66+0.57 8.93+0.66 9.74_+0.73 盲肠 大肠杆菌 9.84+0.82 8.04-+0.75 7.93-+0.6 1 乳酸菌/大肠杆菌 O.88 1.11 1.23 2.3对肉鸡免疫器官的影响 益生素对肉鸡免疫器官指数的影响见表4。 表4益生素对肉鸡免疫器官指数的影响 g・kg一 由表4可知,饲料中添加益生素后,胸腺指数 T2组显著高于C组(P<0.05),但与T1组差异不显 著(P>O.05),脾脏指数T2组高于其他组,但无显 著差异(P>0.05),法氏囊指数T2组显著高于C和 T1组(P<0.05)。 2.4对肉鸡血清中免疫球蛋白含量的影响 益生素对肉鸡血清中免疫球蛋白含量的影响 见表5。 表5益生素对肉鸡血清中免疫球蛋白含量的影响 由表5可知,饲料中添加益生素后,肉鸡血清 中IgG含量T1组最高,C最低,但各组之间无显著 22饲料博览2013年第3期 差异(P>0.05),IgM含量T2显著高于c组(P<0.05), 但与T1组无显著差异(P>0.05)。 3讨论 3.1提高生产性能 益生菌在动物消化道内生长繁殖过程中,能 产生多种消化酶或者刺激消化道腺体增加对消化 酶的分泌,并与动物体内的消化酶类一同发挥作 用,从而促进饲料成分的降解和利用,提高了饲 料的消化利用率,有利于动物生长发育。本研究 结果表明,益生菌制剂一定程度上可提高肉鸡生 长性能和饲料利用率,但差异不显著(P>0.05),这 与白云飞等和谭莉等的研究结果一致 。 3.2调节肠道菌群平衡 益生菌会以活菌形式直接进入动物胃肠道 内,通过营养竞争和占位竞争,参与胃肠道微生 物的平衡 。动物消化道内存在种类繁多的微生 物,与自身的营养、生长、免疫、抵抗病原菌入 侵和消除某些化合物的毒性等都有密切关系。禽 类盲肠内容物中微生物的种类和数量具有相对稳 定性。刘卫东等报道,给肉鸡饲喂益生菌能显著 提高乳酸杆菌和双歧杆菌的数量,降低大肠杆菌 的数量 。段颖等报道,日粮中添加益生菌使鸡盲 肠内容物中乳杆菌和双歧杆菌的数量均显著增加 (P<0.05),大肠杆菌、葡萄球菌和肠球菌的数量均 显著减少(P<0.05)I 。本试验结果表明,甘粮中添 加益生菌使空肠和盲肠中大肠杆菌数低于对照 组,增加乳酸菌数量和乳酸菌与大肠杆菌比值, 说明有益菌在肠道内发挥生物学屏障和竞争性排 阻作用,有害菌难以附着在肠道细胞上而游离存 在,难以获得自身增殖所需要的养分,降低了有 害菌的数量。潘木水在1日龄黄羽肉鸡基础日粮 中添加复合益生菌0-3%,结果表明,饲喂14 d 后,试验组小肠淀粉酶、蛋白酶和肠糜蛋白酶的活 性显著升高,与对照组相比,其活性分别提高 32%、15%和18%,肉鸡饲粮中添加乳酸菌和芽孢 杆菌,可以刺激肉鸡胰腺淀粉酶和蛋白酶的分泌 。 3.3提高机体免疫力 法氏囊是禽类特有的体液免疫中枢免疫器 官,胸腺是细胞免疫中枢器官,两者分别是B和T 淋巴细胞分化成熟的场所,脾脏是禽类最大的外 周免疫器官,参与全身的非特异性及特异性免 疫,中枢及外周免疫系统器官的发育状况直接决 定着畜禽机体的免疫水平。免疫器官重量增加一 般认为是其自身细胞生长发育和增殖所致, 为免疫增强的表现,其指数的提高表明该器官成 熟快。唐志刚等在1日龄AA肉仔鸡基础日粮中添 加益生菌0.01%,结果表明,益生菌能极显著提高 肉鸡前期的日增重和料重比(P<O.O1),免疫器官指 数也有所增加(P>O.05);添加益生菌使肉鸡前期的 总胆固醇和甘油 酯水平显著降低(_P<0.05),尿素 氮含量极显著降低(P<O.01),后期血清中白蛋白和 血清总蛋白含量显著升高(P<O.05),甘油三酯和总 胆固醇含量略有下降(P>0.05);益生菌可以提高 肉鸡生产性能,增强机体免疫功能,促进蛋白质 在体内的沉积t 910雷燕试验结果表明,益生菌能显 著降低20 d肉鸡十二指肠、空肠和总的小肠相对 长度,显著增加回肠相对长度(P<O.05);对20和 41 d十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度、隐窝深度 以及V/C均无显著影响(P>O.05),但有提高趋势; 能显著提高7、20、41 d的十二指肠淀粉酶、脂肪 酶和空肠淀粉酶的活性(P<O.05),显著提高7 d乙 酸、20 d的丙酸及7、20、41 d肓肠丁酸含量(P< 0.05);有提高20 d肉鸡直肠粪便中乳酸杆菌数量 和降低大肠杆菌数量的趋势,各组问差异不显著 (P>O.05),益生菌能提高肉鸡的生产性能、十二指 肠和空肠相关酶的酶活、盲肠VEA含量,改善肠 道微生物菌群数量和结构;且前期效果大于后 期” 。陈凤芹在1日龄皖南黄肉用仔鸡基础日粮中 分别添加益生素0、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%。结 果表明,0.4%和0.6%两个水平益生素组的平均日 增重较高,平均日采食量较低,料重比较优, 0.2%和0.8%水平益生素组的平均日增重和料重比 差于对照组差,O.2%水平益生素组的全净膛率显 著低于对照组(P<O.05),0.6%水平益生素组的胸 肌率显著高于0.8%组(P<O.05),益生素对皖南黄 鸡的其他屠宰性能指标无显著影响(P>O.05);添加 益生素对肉样的化学组成、氨基酸组成无显著影 响(P>O.05),0.8%水平益生素组的一些氨基酸含 量有所增加… 。 本试验结果表明,添加益生菌制剂可显著提 高肉鸡胸腺指数和法氏囊指数,与张春杨等和杨 桂芹等研究结果一致[12-1 31。免疫球蛋白能够中和、 排斥病原体、防止细菌、病毒与黏膜结合,促进 外分泌液中天然抗菌因子的作用,提高动物机体 Animal Nutrition动物营养 抵抗疾病和不良环境能力,促进动物的生长发 育。本试验结果表明,益生素可显著提高IgM的含 量(P<O.05),这与杨玉荣等研究结果一致 。益生 菌本身就是一种非特异性免疫调节因子,可刺激 机体分泌免疫球蛋白,增强自然杀伤细胞活性, 提高动物免疫能力。 【参考文献】 [1]Benvacoub J,Czarnecki-Maulden G L,Cavadini C,et a1.Supple— mentation 0f fo0d with enteI_I】c0ccus faecium(SF68)stimulates im— mune functions in young dogs[J].Journal of Nutrition,2003,133 (4):1 158一l 162. [2 1杨玉荣,郑世民,马春全,等.雏鸡服用益生素后局部黏膜免疫 组织抗体生成细胞的动态变化[J】.中国预防兽医学报,2004, 26(5):37—40. [3】 门云飞,张蓉,叶玉娥,等.复配益生菌添加剂对青脚麻鸡性能 指标的影nN[J].合肥工业大学学报(自然科学版),2012,35 (4):526—530. [4】谭莉,袁栋,张云兵,等.不同类型芽孢杆菌制剂对肉鸡生长性 能和排泄物氨逸失的影响f JI.动物营养学报,2012,24(5): 877—885. [5】Fuller R,Gibson G R.Modiifcation of the intestinal microbiora US- ing probiotics and prebiotics[J].Scandinavian Journal of Gastroen— terology,1997,32:28—31. [6 J刘卫东,宋素芳,程璞.甘露寡糖和益生菌对肉仔鸡生产性能 和肠道菌群的影响[J1.家畜生态学报,201 1,32(1):32—35. 【7 1段颖,赵玉鑫,潘翠玲,等.富硒益生菌对蛋鸡抗氧化能力和肠 道菌群及消化酶活性的影IJN[j].南京农业大学学报,2010,33 (2):68—72. 【8】潘木水,周风珍,张玲华,等.复合益生菌对肉仔鸡小肠内容物 酶活性的影响[J1.中国饲料,2005(23):21—22. [9】唐志刚,王俊峰,温超,等.益生菌对肉鸡生产性能、免疫器官 指数和血清指标的影响Ⅲ.江苏农业科学,2010(4):208—210. [10】雷燕.益生菌对肉鸡生产性能、消化道生理及肠道微生物区系 的影响【D].雅安:四川农业大学,2009. [11]陈凤芹.益生素对皖南黄鸡生产性能和肉品质量影响的研究 【D].合肥:安徽农业大学,2001. [121张春杨,牛钟相,常维山,等.益生菌剂对肉用仔鸡的营养、免 疫促进作用[J1.中国预防兽医学报,2002,24(1):53—56. [13】杨桂芹,李玲,宁志利.益生菌剂、异麦芽寡糖对肉仔鸡免疫 功能影响的研究【J1.畜牧与兽医,2006,38(2):4-6. 2013*t3期饲料博览23