·非酒精性脂肪性肝病·
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非诺贝特联合双环醇治疗非酒精性脂肪性肝病患者肝组织PPARγ2mRNA水平变化∗
李钊,黄赞松,李繁
【摘要】 目的 探讨应用非诺贝特联合双环醇治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者的疗效及肝组织过氧化物
酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)水平变化。方法 2018年2月~2019年12月我院收治的NAFLD患者66例,采用随机数字表法分为对照组33例和观察组33例,分别给予双环醇片口服或在此基础上给予非诺贝特片口服治疗,两组均治疗3个月。肝穿刺获得肝组织,采用PCR法检测肝组织PPARγ2mRNA水平,采用化学发光免疫分析法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平,采用免疫比浊法检测血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,使用FC500型流式细胞仪检测外周血CD3、CD4和CD8细胞百分比。结果 在治疗结束时,观察组总有效率为97.0%,显著高于对照组的66.7%(P<0.05);观察组肝组织PPARγ2mRNA相对水平为(1.5±0.1),显著高于对照组【(1.1±0.2),P<0.05】;观察组血清TNF-α水平为(26.4±3.1)pg/mL,显著低于对照组【(32.8±6.9)pg/mL,P<0.05】,血清IL-6水平为(35.9±4.9)ng/L,显著低于对照组【(46.4±5.8)ng/L,P<0.05】,血清hs-CRP水平为(5.1±1.4)mg/L,显著低于对照组【(8.4±1.9)mg/L,P<0.05】;观察组外周血CD3细胞百分比为(80.2±11.5)%,显著高于对照组【(60.5±7.7)%,P<0.05】,外周血CD4细胞百分比为(44.7±5.8)%,显著高于对照组【(31.4±4.8)%,P<0.05】,CD4/CD8细胞比值为(1.5±0.4),显著高于对照组【(1.1±0.3),P<0.05】。结论 联合应用非诺贝特和双环醇治疗NAFLD患者有短期疗效,可能与提高了肝组织PPARγ2水平,降低了血清炎症细胞因子水平有关,值得进一步研究。
Applicationoffenofibrateandbicyclolcombinationintreatmentofpatientswithnon-alcoholicfattyliverdiseasesand
【Abstract】 Objective Toexploretheefficacyoffenofibrateandbicyclolcombinationinthetreatmentofpatientswithnon
2019,andwererandomlydividedintocontrolgroup(n=33)andobservationgroup(n=33),receivingbicyclolorbicyclolandfenofibratecombinationforthreemonths.Thecurativeeffectinthetwogroupsaftertreatmentwerecompared.Theliverbiopsieswereperformed,andhepaticPPARγ2messengerribonucleotide(mRNA)wereassayedbyPCR.SerumcytokinesandperipheralbloodTlymphocytesubsetswerecompared.Results Attheendofthetreatment,thetotaleffectiverateintheobservationgroupwas97.0%,whichwasmuchhigherthanthatinthecontrolgroup(66.7%,P<0.05);therelativelevelofPPARγ2mRNAinserumIL-6levelwas(35.94.9)ng/L,significantlylowerthan(46.45.8)ng/L,P<0.05],andserumhigh-sensitivityC-livertissuesintheobservationgroupwas(1.5±0.1),significantlyhigherthan[(1.1±0.2),P<0.05]inthecontrol;serumreactiveprotein(hs-CRP)levelwas(5.1±1.4)mg/L,muchlowerthan[(8.4±1.9)mg/L,P<0.05]inthecontrol;the
∗基金项目:贺州市科学研究与技术开发计划项目(贺科转作者单位:542899广西壮族自治区贺州市人民医院感染性疾第一作者:李钊,男,38岁,医学硕士,主治医师。研究方向:肝脏疾病的诊治。E-mail:li1022liao@163.com
通讯作者:黄赞松,E-mail:1019846481@qq.com
【关键词】 非酒精性脂肪性肝病;非诺贝特;双环醇;过氧化物酶体增殖物激活受体γ2;细胞因子;治疗 DOI:10.3969/j.issn.1672-5069.2021.01.016
542899,GuangxiZhuangAutonomousRegion,China
changesofhepaticPPARγ2 LiZhao,HuangZansong,LiFan.DepartmentofInfectiousDiseases,People'sHospital,Hezhou
(PPARγ2)mRNAlevel.Methods 66patientswithNAFLDwereadmittedtoourhospitalbetweenFebruary2018andDecember
-alcoholicfattyliverdiseases(NAFLD)anditsinfluenceonhepaticperoxisomeproliferator-activatedreceptorgammaγ2
tumornecrosisfactor-α(TNF-α)levelwas(26.4±3.1)pg/mL,significantlylowerthan[(32.8±6.9)pg/mL,P<0.05],
percentageofperipheralbloodCD3cellswas(80.2±11.5)%,significantlyhigherthan[(60.5±7.7)%,P<0.05],thesignificantlyhigherthan[(31.4±4.8)%,P<0.05],andtheratioofCD4/CD8cellswas(1.5±0.4),significantlyhigherthan[(1.1±0.3),P<0.05]inthecontrol.Conclusion TheoraladministrationoffenofibrateandbicyclolcombinationinthetreatmentofpatientswithNAFLDhasashort-termefficacy,percentageofperipheralbloodCD4cellswas(44.7±5.8)%,
1908022)
病科(李钊,李繁);右江民族医学院附属医院消化内科(黄赞松)
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whichmightberelatedtotheincreasedhepaticPPARγ2mRNAlevelsandthereductionofserumcytokinelevels.
【Keywords】
Cytokines;Therapy
Nonalcoholicfattyliverdiseases;Fenofibrate;Bicyclol;Peroxisomeproliferator-activatedreceptorγ2;
非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfattyliver
disease,NAFLD)为饮酒以外的多种原因所致的肝脏
食物摄入,禁烟酒,进行适当体育锻炼,保持血糖和血压平稳。在对照组,给予双环醇片(北京协和药厂,国药准字H20051712)50mg口服,3次/d;观察组在对照组治疗的基础上给予非诺贝特片(迪沙药业集团有限公司,国药准字H37022898)0.1口服,11.3肝组织PPARγ2mRNA检测 常规肝穿刺,取得肝组织。采用Trizol试剂(Invitrogen公司)提取肝组织总RNA,使用M-MLV逆转录酶(美国Promega公司)合成cDNA,采用荧光定量聚合酶链式反应检测PPARγ2mRNA,经内参基因进行校正后获得其相对水平(PPAR-γ2总拷贝/GAPDH总拷贝)。采用荧光定量聚合酶链式反应检测PPARγ2mRNA,上游引物序列为5′-ATTTTCTGGAGAGCT-TGGC-3′,下游引物序列为5′-GT-GAGGGTCTCTCTCTTCCT-3′,经内参基因进行校正后获得其相对水平(PPAR-γ2总1.4血清检测 使用全自动生化分析仪检测血生化指标(宁波医杰生物科技有限公司);采用化学发光免疫分析法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平(苏州长光华医生物试剂有限公司)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平(北京普恩光德生物科技开发有限公司);采用免疫比浊法检测血清超敏C反应蛋白(high-sensitivityC-reactiveprotein,hs-CRP)水平(武汉明德生物科技股份有限公司);使用FC500型流式细胞仪(美国贝克曼库尔特)检测外周1.5疗效判断 显效:症状及体征消失或明显改善,肝功能和血脂指标复常,B超检查显示肝脏形态学有效:症状及体征消失或明显好转,肝功能和血脂指标较治疗前下降1/2以上,B超检查显示脂肪肝程度缓解,CT检查表现为脂肪变程度缓解;无效:症状及体征无明显好转,肝功能和血脂各项指标未下降,1.6统计学方法 应用SPSS21.0软件处理和分析,计量资料以(x±s)表示,采用t检验,率的比较采用x2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。B超和CT检查表现未达到有效标准[7]。
复常或脂肪肝程度缓解,CT表现为肝/脾比值>1.0;血CD3、CD4和CD8细胞百分比。拷贝/GAPDH总拷贝)。次/d。两组均持续用药3个月。
脂肪堆积,表现为慢性肝组织脂肪沉积和慢性炎症目前,针对NAFLD尚无特效的疗法。双环醇为联苯避免肝细胞核DNA受损、维持肝细胞膜稳定性,进而避免肝细胞凋亡,为临床常用的护肝药物,但其对非诺贝特为第三代苯氧乙酸类调血脂药物,可抑制胆固醇吸收及其体内合成,并促进其转运,广泛应用于处理高血脂和高血糖,发现其能调节机体的血脂代谢紊乱
[3,4]
等脂质代谢紊乱的一系列临床和病理学综合征[1]。双酯结构类似物,既往研究[2]显示其可清除自由基、
NAFLD患者肝细胞内脂质蓄积的改善作用不强。
岛素敏感性,其作用与核受体转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisomeproliferators-activatedreceptors,PPARs)有关[5]。PPARsgamma2(PPAR-γ2)是PPARs的亚型之一,可调节脂肪细胞增殖分化和脂肪代谢。本研究应用非诺贝特联合双环醇治疗NAFLD患者,观察了疗效及肝组织PPARγ2水平1 资料与方法的变化,现报道如下。
1.1一般资料 2018年2月~2019年12月我院收治的NAFLD患者66例,男34例,女32例;年龄32~71岁,平均年龄为(53.4±5.7)岁;病程0.5~11
。非诺贝特能诱导脂肪酸氧化、维持胰
年,平均为(6.2±1.8)年;体质指数(bodymassindex,BMI)为20.2~31.5kg/m2,平均为(26.3±2.2)kg/m2。符合《非酒精性脂肪性肝病诊疗指女性饮酒乙醇摄入量>70g/周,男性乙醇摄入量>140g/周,排除病毒性肝炎、药物性肝损伤、肝豆状核变性、自身免疫性疾病、伴有严重的感染、合并贫血、存在肝脏手术史、滥用药物或毒品史、入组前2月内接受过益生菌或调脂降糖药物治疗、对双环醇或非诺贝特过敏。采用随机数字表法将患者分成两组,每组33例,两组性别、年龄、病程、BMI和合并腹型肥胖等一般资料比较无统计学差异(P>0.05),具有可比性。本研究方案已经获得我院医学伦理委员1.2治疗方法 两组均控制饮食,避免高热量高蛋白会审核批准,患者签署知情同意书。
南》[6]的诊断标准,合并腹型肥胖50例。排除标准:
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2 结果
2.1两组疗效比较 在治疗结束时,观察组显效17
观察组肝组织PPARγ2mRNA水平为(1.5±0.1),显2.3两组血清炎性因子水平比较 在治疗后,观察组2.4两组外周血淋巴细胞亚群水平比较 在治疗后,观察组外周血CD3、CD4细胞百分比和CD4/CD8细胞比值显著高于对照组(P<0.05,表2)。血清炎性因子水平显著低于对照组(P<0.05,表1)。著高于对照组【(1.1±0.2),P<0.05】。
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例(51.5%),有效15例(45.5%),无效1例(3.0%);对照组显效8例(24.2%),有效14例(42.4%),无效11例(33.3%)。观察组总有效率为意义(P<0.05)。
97.0%,显著高于对照组的66.7%,差异具有统计学2.2两组肝组织PPARγ2mRNA水平比较 治疗后,
例数
观察组治疗前
治疗后
对照组治疗前
治疗后
与对照组比,①P<0.05
例数
观察组治疗前
治疗后
对照组治疗前
治疗后
3333333333333333
表1 两组血清炎性因子水平(x±s)比较
TNF-α(pg/mL)60.0±7.426.4±3.1①57.4±8.332.8±6.9
IL-6(ng/L)70.1±10.235.9±4.9①68.5±14.046.4±5.8
hs-CRP(mg/L)15.7±3.65.1±1.4①14.9±2.58.4±1.9
表2 两组外周血淋巴细胞亚群(x±s)比较
CD3(%)54.8±7.980.2±11.5①56.1±6.260.5±7.7
CD4(%)28.6±3.144.7±5.8①26.2±2.431.4±4.8
CD4/CD8比值0.85±0.211.51±0.39①0.84±0.241.13±0.32
3 讨论
与对照组比,①P<0.05
认为脂代谢紊乱(肥胖)和胰岛素抵抗为疾病的初次打击,可导致肝脏发生脂肪变性,并降低肝细胞活力,使得肝脏发生氧化应激损伤及炎症损伤,进而产生二次打击,最终导致坏死,甚至肝纤维化[11,12]。双环醇可显著提高线粒体膜流动性,改善线粒体腺嘌呤核苷三磷酸酶活性,从而缓解肝脏能量代谢紊乱,避免肝脏氧化应激损伤,并抑制细胞核内核因子κB结合活性,进一步降低炎症因子的释放[13]。研究[14]显示非诺贝特可通过上调胰腺胰岛素合成转录因子基因表达,促进胰岛素的生物合成,降低机体胰岛素抵抗,从而减少肝脏脂质累积,避免初次打击,从而减少肝细胞脂肪变性损伤导致的炎症级联反应,降低多种炎症因子血清水平,控制NAFLD患者肝脏慢性炎症反应进程。因此,本研究观察组血清TNF-α、IL-6和hs-CRP水平显著低于对照组。免疫功能异常被认为是导致NASH患者肝纤维化和炎症的基础,研究[15]显示肝脏局部微环境中高水平的脂肪酸可降低组织CD4+细胞聚集。本研究在治疗后,观察组外周血CD3、CD4细胞和CD4/CD8细胞比值
随着经济生活和饮食结构的改变,肥胖及代谢性疾病发病率呈上升趋势。研究显示NAFLD作为获得性代谢应激性肝损伤,发病群体具有低龄化发展趋势,已经成为国内第一大慢性肝病[8]。成年人NAFLD发病率为6%~45%。NAFLD患者并发肝细胞癌风险显著增加,严重威胁公共健康[9]。如何科题。目前,NAFLD尚无公认的特效治疗药物,治疗的首要目标为降低体脂和肝脏脂肪沉积,避免因“二次打击”而导致肝纤维化病情进展,降低二型糖尿病和代谢综合征等合并症的发生。双环醇为我国自主研发的护肝药物。研究[10]显示双环醇可调控药物代谢酶活性、促进化学毒物和致癌物代谢,起到护肝的效果。非诺贝特则可通过调节胆固醇代谢、改善胰岛素抵抗,发挥综合调节机体代谢的作用。本研究将非诺贝特和双环醇联合应用于治疗NAFLD患者,发现能短期改善患者各项指标。
目前,NAFLD发病机制尚未明确,但学者普遍学有效地处理NAFLD患者成为临床亟待解决的问
Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.显著高于对照组,说明治疗后观察组免疫功能得到了明显的改善。分析其原因可能为双环醇降低了肝脏损伤,观察组联用非诺贝特,效果更好。研究[16]显示非诺贝特一方面可改善血脂代谢,避免高水平脂肪酸对机体免疫功能的抑制作用;另一方面,非诺贝特可抑制炎性细胞因子、趋化因子和促纤维化基因的表达,减少肝星状细胞的活化,抑制肝纤维化的发生
[17]
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实用肝脏病杂志2021年1月第24卷第1期 JPracHepatol,January.2021.Vol.24No.1
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能的恢复。
,避免了免疫细胞的耗竭,帮助机体免疫功
既往研究[18]显示,非诺贝特为PPAR-α的配体,动物实验证实其可通过激活PPAR-α信号通路,抑制机体炎症反应及肝纤维化进程,但临床实验中尚无确切的证据表明PPAR-α激动剂能改善
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actionsbetweenbicyclolandco-administereddrugsinratand
NAFLD病情。PPARs属于细胞核激素受体超家族,PPAR-α和PPARγ2均为其亚型之一,PPARγ2主要在机体脂肪组织中表达,是调节三酰甘油稳态的主要角色,也可调控脂肪细胞增殖,还可调节机体炎症反应,抑制氧化应激损伤[19]。本研究对NAFLD患者肝组织PPARγ2mRNA进行了研究,发现治疗后,观察组肝组织PPARγ2mRNA水平显著高于对照组,说明非诺贝特可能通过提高肝组织PPARγ2表达,促进脂肪重新分布,使脂肪从肝脏等内脏组织转移并消耗,进而抑制肝细胞脂肪变性,减轻肝脏巨噬细胞浸润,而非诺贝特影响PPARγ2表达的具体机制则有待进一步研究。在双环醇基础上应用非诺贝特可进一步调节机体血脂代谢紊乱,减轻肝细胞损伤,进而促进肝功能恢复。因此,以症状、体征、肝功能以及血脂各项指标的改善作为疗效判断的标准,发现观察组总有效率显著高于对照组。
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