花生黑腐病菌碳水化合水解酶的全基因组分析

陈欣瑜，周　荃，罗　梅，等．花生黑腐病菌碳水化合水解酶的全基因组分析［Ｊ］．江苏农业科学，２０１９，４７（２２）：５２－５６．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１９．２２．０１０

花生黑腐病菌碳水化合水解酶的全基因组分析

陈欣瑜，周　荃，罗　梅，董章勇

（仲恺农业工程学院，广东广州５１０２２５）

　　摘要：花生黑腐病（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍｂｌａｃｋｒｏｔｏｆｐｅａｎｕｔ，简称ＣＢＲ）是由寄生帚梗柱孢霉（ＣｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍｐａｒａｓｉｔｉｃｕｍＣｒｏｕｓ，Ｗｉｎｇｆｉｅｌｄ＆Ａｌｆｅｎａｓ）侵染引起的一种严重的检疫性病害，给农业生产造成了巨大的经济损失。以笔者所在实验室前期获得的花生黑腐病菌全基因组１８３６６个蛋白序列为基础，利用ＣＡＺｙｍｅｓＡｎａｌｙｓｉｓＴｏｏｌｋｉｔ预测程序进行注释，共获得注释碳水化合水解酶（ＣＡＺｙｍｅｓ）１１９７个，分为６个家族，分别为１９１个辅助酶（ａｕｘｉｌｉａｒｙａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，简称ＡＡｓ）、１３７个糖基转移酶（ｇｌｙｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ，简称ＧＴｓ）、４２２个糖苷水解酶（ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｈｙｄｒｏｌａｓｅｓ，简称ＧＨｓ）、４８个多糖裂解酶（ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｌｙａｓｅｓ，简称ＰＬｓ）、３００个碳水化合物酯酶（ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｅｓｔｅｒａｓｅｓ，简称Ｃｅｓ）、９９个碳水化合物绑定结构（ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ－ｂｉｎｄｉｎｇｍｏｄｕｌｅｓ，简称ＣＢＭｓ）。根据Ｂｌａｓｔ２ＧＯ对花生黑腐病菌ＣＡＺｙｍｅｓ蛋白的功能分析结果，将ＣＡＺｙｍｅｓ分为３大类分别为生物进程、细胞成分、分子功能类。该研究可为进一步解析ＣＡＺｙｍｅｓ的功能奠定基础，为深入研究该致病菌侵染植物的作用机制提供了一定的理论依据。

　　关键词：花生黑腐病菌；寄生帚梗柱孢霉；水化合水解酶；全基因组；分析

　　中图分类号：Ｓ４３５．６５２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１９）２２－００５２－０４

　　花生黑腐病（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍｂｌａｃｋｒｏｔｏｆｐｅａｎｕｔ，简称ＣＢＲ），别称圆锥黑斑病或大豆红顶腐烂病，是一种由寄生帚梗柱孢霉（ＣｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍｐａｒａｓｉｔｉｃｕｍＣｒｏｕｓ，Ｗｉｎｇｆｉｅｌｄ＆

１－２］Ａｌｆｅｎａｓ）侵染引起的真菌性病害［。该病害最早于１９６５年１］在美国乔治亚州的花生产区被发现［，目前已蔓延到美国东１－４］南部、日本、印度及澳大利亚的花生产区［。该病害可侵染

素。碳水化合水解酶类尤其是植物细胞壁降解酶对病原菌的

１０－１１］

。近年来，随着越来越多侵染能力和特性具有重要作用［

病原菌全基因组测序的完成，ＣＡＺｙｍｅｓ的注释和比较分析成

１２］

为了重要的研究方向［。近年来，碳水化合物结构与功能活

性酶类（ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ－ａｃｔｉｖｅｅｎｚｙｍｅｓｄａｔａｂａｓｅ，简称ＣＡＺｙ）数

１３］据库的建立［极大地推进了国内外学者对于植物病原菌细

花生的果针、荚果和根系，罹病部位变黑腐烂，并导致植株萎

５］

。由于其潜在危险性，我蔫和死亡，是一种毁灭性的病害［

ＡＺｙｍｅｓ胞壁降解酶活性基因的注释与聚类分析工作。目前Ｃ主要分为６大类分别为辅助酶类家族（ａｕｘｉｌｉａｒｙａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，简称ＡＡｓ）、糖基转移酶（ｇｌｙｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ，简称ＧＴｓ）、糖苷水解酶（ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｈｙｄｒｏｌａｓｅｓ，简称ＧＨｓ）、多糖裂解酶（ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｌｙａｓｅｓ，简称ＰＬｓ）、碳水化合物酯酶ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｅｓｔｅｒａｓｅｓ，简称ＣＥｓ）、碳水化合物绑定结构家族（

［１４］

（ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ－ｂｉｎｄｉｎｇｍｏｄｕｌｅｓ，简称ＣＢＭｓ）。目前，已经１０，１５－１６］

ＡＺｙｍｅｓ得到分析［。但是迄今为止，有多种病原菌的Ｃ

国于２００７年将寄生帚梗柱孢霉列入《中华人民共和国进境植

６－７］

物检疫性有害生物名录》中［。花生黑腐病是一种典型的

土传和种传病害。其中，种子传播是病害迅速蔓延的最主要原因，这也加大了其防治难度。农业防治采取３～５年轮作的防治方法，该方法仅能控制微小菌核数量，不能有效控制病害的发生；化学防治方面，目前没有有效的杀菌剂可以使用；在发病严重区域，土壤熏蒸可起到一定作用，但是费用昂贵

［７－８］

对帚梗柱孢霉ＣＡＺｙｍｅｓ的分析仍未见报道。笔者所在实验ｙｌｐａｒ１４０１７菌株的全基室前期测定并组装了花生黑腐病菌Ｃ

因组序列，本研究在此基础上利用生物信息学手段对其ＣＡＺｙｍｅｓ进行注释分析，揭示ＣＡＺｙｍｅｓ家族的分类情况，以期为今后深入开展其ＣＡＺｙｍｅｓ的功能研究提供参考。１　材料与方法１．１　基因组数据来源

本研究分析所用基因组数据来源于仲恺农业工程学院植物病理学研究所前期测序获得的花生黑腐病菌Ｃｙｌｐａｒ１４０１７菌株的全基因组拼接序列，共包含１８３６６个蛋白序列。１．２　方法

ＣＡＴ（ＣＡＺｙｍｅｓＡｎａｌｙｓｉｓＴｏｏｌｋｉｔ，ｈｔｔｐ：／／ｃｒｉｃｋｅｔ．ｏｒｎｌ．ｇｏｖ／ｃｇｉ－ｂｉｎ／ｃａｔ．ｃｇｉ）数据包是专门用于ＣＡＺｙｍｅｓ注释和分析的

１４］

程序［。基于ｄｂＣＡＮ数据库，用Ｈｍｍｅｒ３．０搜索ＣＡＺｙｍｅｓ

。目前，我国对花生黑腐病病害防治的主要方法是培

［９］

养抗性品种，但目前还没有培育出高抗品种，只有一些中抗的花生品种

。因此，从分子生物学角度进一步研究花生黑腐

病菌致病机制对于该病的防治具有重要意义。

碳水化合水解酶类（ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅａｃｔｉｖｅｅｎｚｙｍｅｓ，简称ＣＡＺｙｍｅｓ）在病原真菌的致病过程中具有重要的作用。病原真菌分泌的碳水化合水解酶参与了侵染寄主植株的过程，是植物病原菌侵染过程中突破寄主细胞第１道屏障的关键因

收稿日期：２０１８－０７－２６

基金项目：广东省普通高校特色创新项目（编号：２０１６ＫＴＳＣＸ０６０）。作者简介：陈欣瑜（１９９４—），女，四川自贡人，硕士研究生，主要从事ｍａｉｌ：１０８４９１８４０６＠ｑｑ．ｃｏｍ。植物病理学研究。Ｅ－

通信作者：董章勇，博士，副教授，主要从事植物病理学研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｏｎｇｚｈａｎｇｙｏｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ。

的编码基因，采用ｈｍｍｓｃａｎ－ｐａｒｓｅｒ和ａｌｌ．ｈｍｍ．ｐｓ．ｌｅｎ进行处

江苏农业科学　２０１９年第４７卷第２２期

理，然后通过ＣＡＴ程序进行ＣＡＺｙｍｅｓ比对预测，获得花生黑ＡＺｙｍｅｓ蛋白。用Ｂｌａｓｔ２ＧＯ分析花生黑腐病菌腐病菌的Ｃ

ＣＡＺｙｍｅｓ蛋白，结合ＷＥＧＯ整理分析结果。２　结果与分析

２．１　花生黑腐病菌ＣＡＺｙｍｅｓ总体分布

将“１．１”节中获得的１８３６６个序列和ＣＡＴ数据包进行比对，共有１１１４个蛋白序列，获得注释水解酶家族总数为１ＢＭ为９９个、ＣＥ为３００个、ＧＨ为４２２个、ＧＴ１９７个。其中Ｃ为１３７个、ＰＬ为４８个、ＡＡ为１９１个。ＧＨｓ含量最高，占总数的３５％，ＣＥｓ、ＡＡｓ、ＧＴｓ、ＣＢＭｓ、ＰＬｓ分别占总数的２５％、１６％、１１％、８％、４％（图１）。而ＣＢＭ的９９个基因归类于２２个基ＣＥ的３００个基因归类为１２个基因家族；ＧＨ的４２２因家族；

个基因归类在６４个基因家族；ＧＴ的１３７个基因归类为３７个基因家族；ＰＬ则为８个家族，而ＡＡ的１９１个基因归类于９个家族中。

２．２　花生黑腐病菌中含有的ＧＨｓ

根据糖苷水解酶数据进行分析结果（图２）显示ＧＨ１０９数量最多，为５２个，紧随其后为ＧＨ３，为４８个，同时ＧＨ１６、ＧＨ１８、ＧＨ２８、ＧＨ３１、ＧＨ４３、ＧＨ４７、ＧＨ５、ＧＨ７６、ＧＨ７８数量较

４个亚家族类别。的类别，共有６２．３　花生黑腐病菌中含有的ＧＴｓ

—５３—

０个。该类别为六大水解酶类中亚家族数最多多，均超过了１

根据糖基转移酶数据进行分析结果（图３）发现，ＧＴ２数量远远多于其他亚家族，为３１个，约占ＧＴｓ总数量的２３％。其次，ＧＴ１和ＧＴ３２的数量也较多，都为１３个。除此之外，还含有ＧＴ４、ＧＴ６４、ＧＴ９０等３４类蛋白。该类别为六大水解酶类中亚家族数第２多的类别。

２．４　花生黑腐病菌中含有的ＣＢＭｓ

根据碳水化合物绑定结构家族数据进行分析结果（图４）表明，数量最多的蛋白类别为ＣＢＭ５０，为２０个，约占ＣＢＭｓ总数的２０％，其次是ＣＢＭ１，约占ＣＢＭｓ总数的１５％。除此之外，还含有ＣＢＭ１８、ＣＢＭ６７、ＣＢＭ２４等２０类蛋白。

２．５　花生黑腐病菌中含有的ＣＥｓ

根据碳水化合物酯酶数据进行分析结果（图５）发现，ＣＥ１０数量远远多于其他亚家族，为１６４个，约占ＣＥｓ总数量的５５％。其次，ＣＥ１数量较多，为５１个。除此之外，还含有ＣＥ４、ＣＥ５、ＣＥ８、ＣＥ１６等１０类蛋白。

—５４—江苏农业科学　２０１９年第４７卷第２２期

２．６　花生黑腐病菌中含有的ＡＡｓ

根据辅助酶类家族数据进行分析结果（图６）发现，数量最多的蛋白类别为ＡＡ７，为８２个，约占ＡＡｓ总数的４３％，其Ａ３，约占ＡＡｓ总数的２６％。除此之外，还含有ＡＡ１、次是Ａ

ＡＡ２、ＡＡ４、ＡＡ９等７类蛋白。

外，还含有未进化、细胞生源或组织成分、细胞进程、生物调节进程、刺激反应、生物调节、信号命令、排毒等８小类。在细胞成分大类中数量最多的为细胞外区域类，为５８个，约占细胞成分大类总数的３３％，除此之外，还含有细胞部分、细胞器部分、细胞膜、大分子复合物、细胞器、细胞膜部分、细胞外区域

２．７　花生黑腐病菌中含有的ＰＬｓ

根据多糖裂解酶数据进行分析结果（图７）发现，数量最多的蛋白类别为ＰＬ１，为２０个，约占ＰＬｓ总数的４２％，其次是ＰＬ３，约占总数的２７％。除此之外，还含有ＰＬ２２、ＰＬ４、ＰＬ９等６类蛋白。该类别为６大水解酶类中亚家族数最少的类别。２．８　花生黑腐菌ＣＡＺｙｍｅｓ蛋白Ｂｌａｓｔ２ＧＯ分析结果

根据Ｂｌａｓｔ２ＧＯ对花生黑腐病菌ＣＡＺｙｍｅｓ蛋白的功能分析结果，将ＣＡＺｙｍｅｓ分为三大类，分别为生物进程、细胞成分、分子功能类（图８）。在生物进程大类中数量最多的为代谢进程类，为３１１个，约占生物进程大类总数的６９％，除此之

部分等７小类。在分子功能大类中数量最多的为催化活性类，为４２６个，约占分子功能大类总数的７３％，除此之外，还含有联结、转录活性调节剂、转运活性、抗氧化活性、营养储存活性等５小类。３　结论与讨论

随着大量真菌基因组测序的完成，先后有人利用基因组信息开展ＣＡＺｙｍｅｓ家族的预测分析。韩长志等分析了黏绿木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｖｉｒｅｎｓ）Ｇｖ２９－８的３７７个分泌蛋白，并进行

［１６］

进一步的ＣＡＺｙｍｅｓ家族分析，共得到２０１个ＣＡＺｙｍｅｓ。本

江苏农业科学　２０１９年第４７卷第２２期—５５—

本研究分析得到在花生黑腐病菌ＣＡＺｙｍｅｓ家族类别中，ＧＨｓ含量最高，占总数的３５％；其次是ＣＥｓ、ＡＡｓ为１６％、ＧＴｓ、ＣＢＭｓ，分别占总数的２５％、１６％、１２％、８％，ＰＬｓ的含量最少，只有４％。ＧＨ在大多数真菌ＣＡＺｙｍｅｓ里的含量通常最高。韩长志等通过分析了黏绿木霉Ｇｖ２９－８的分泌蛋白发

１６］

现，ＧＨｓ在ＣＡＺｙｍｅｓ中含量最多，占了４６．２７％［。韩长志

Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ（Ｃｅｓａｔｉ）分析的禾谷炭疽菌［

研究并未对花生黑腐病菌Ｃｙｌｐａｒ１４０１７全基因组进行分泌蛋白的筛选，共有１１１４个花生黑腐病菌蛋白序列获得注释，得到的水解酶家族总数为１１９７个。通过分析可知，所得的ＣＡＺｙｍｅｓ里包含有大量的非分泌蛋白。

Ｗｉｌｓｏｎ］中也是ＧＨ最高，占３３．３３％［１８］。而其他种类往往有

所差异，在本研究中，ＣＥ总数仅次于ＧＨ，ＣＢＭ的数量仅为总数的８％。而在黏绿木霉Ｇｖ２９－８菌株中ＣＢＭ占了２５．８７％，ＣＥ数量较少。在禾谷炭疽菌中ＣＢＭ为总数的

１９．８５％，ＧＴ数量占总数的０．７５％［１６－１７］。这种数量上的差异

可能是因为花生黑腐病菌和黏绿木霉、禾谷炭疽菌等病原菌遗传背景存在差异，也可能是因为这些病原菌的寄主植物不同，对寄主植物致病所需产生的水解酶家族和数量也会有不同。

在真菌Ｃ

ＡＺｙｍｅｓ家族中往往都存在着复合类别。本研究中共有１１１４个花生黑腐病菌蛋白序列获得注释，得到的水解酶家族总数为１１９７个。其中部分单个蛋白序列会获得１个或多个蛋白注释，称之为复合型。韩长志等研究发现，在多个真菌的基因组中均存在着此类现象。黏绿木霉Ｇｖ２９－８中发现了４个ＣＢＭ３５／ＧＨ２７，包括２个ＣＥ４／ＣＢＭ１８、１个ＧＨ１８／ＣＢＭ１、１个ＧＨ７／ＣＢＭ１。而禾谷炭疽菌中则发现了３０个ＧＨ／ＣＢＭ、１０个ＡＡ／ＣＢＭ、１个ＣＥ／ＣＢＭ等。同一蛋白具有复合型酶注释功能，推测此类蛋白在发挥功能方面具有复合性。

植物病原真菌通过产生大量的Ｃ

ＡＺｙｍｅｓ来降解植物的多糖类物质，以利于其对植物的侵染并获取其自身所需的营

养［

１８］

。本研究通过大规模数据处理的方法，对其进行ＣＡＺｙｍｅｓ注释和比较分析。本研究可为花生黑腐病菌的致病因子研究提供材料和基础，且为其他植物病原真菌ＣＡＺｙｍｅｓ基因家族的分析建立了初步的筛选方法。

参考文献：

［１］ＢｅｌＤＫ，ＳｏｂｅｒｓＥＫ．Ａｐｅｇ，ｐｏｄ，ａｎｄｒｏｏｔｎｅｃｒｏｓｉｓｏｆｐｅａｎｕｔｓｃａｕｓｅｄ

ｂｙａｓｐｅｃｉｅｓｏｆＣａｌｏｎｅｃｔｒｉａ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，１９６６，５６（１２）：１３６１－１３６４．　

［２］ＷｈｅｅｌｅＴＡ，ＢｌａｃｋＭＣ．ＦｉｒｓｔｒｅｐｏｒｔｏｆＣｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍｂｌａｃｋｒｏｔ

ｃａｕｓｅｄｂｙＣｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍｐａｒａｓｉｔｉｃｕｍｏｎｐｅａｎｕｔｉｎｔｅｘａｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＤｉｓｅａｓｅ，２００５，８９（１１）：１２４５．

［３］ＷｒｉｇｈｔＬＰ，ＤａｖｉｓＡＪ，ＷｉｎｇｆｉｅｌｄＢＤ，ｅｔａｌ．Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆ

Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍｐａｒａｓｉｔｉｃｕｍｉｎｆｅｃｔｉｎｇｐｅａｎｕｔｓ（Ａｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａ）ｉｎＧｅｏｒｇｉａ［Ｊ］．ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｇｙ，２０１０，１２７（２）：１９９－２０６．　

［４］ＴａｚａｗａＪ，ＴａｋａｈａｓｈｉＭ，ＵｓｕｋｉＫ，ｅｔａｌ．Ｎｏｄｕｌａｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ

ｇｒｏｗｔｈｏｆｓｏｙｂｅａｎｓｔａｇｅｄｏｅｓｎｏｔａｆｆｅｃｔｔｈｅｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｔｏｒｅｄｃｒｏｗｎｒｏｔｃａｕｓｅｄｂｙＣａｌｏｎｅｃｔｒｉａｉｌｉｃｉｃｏｌａ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＧｅｎｅｒａｌＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｇｙ，２００７，７３（３）：１８０－１８４．

［５］刘会梅，王向军，封立平．花生黑腐病研究进展［Ｊ］．中国植保导

刊，２０１０（５）：１９－２１．

［６］盖云鹏，潘汝谦，徐大高，等．进境检疫性有害生物———寄生帚梗

柱孢霉［Ｊ］．植物检疫，２０１４（４）：７６－８１．

—５６—江苏农业科学　２０１９年第４７卷第２２期

姜　竹，陈丹丹，刘宏波．花生３－磷酸甘油酰基转移酶基因的功能鉴定［Ｊ］．江苏农业科学，２０１９，４７（２２）：５６－６０．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１９．２２．０１１

花生３－磷酸甘油酰基转移酶基因的功能鉴定

姜　竹，陈丹丹，刘宏波

（浙江农林大学农业与食品科学学院，浙江杭州３１１３００）

　　摘要：花生（Ａｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａ）是我国的主要油料作物，花生油脂的合成受３－磷酸甘油酰基转移酶（ＧＰＡＴ）调控，但其调控机制尚不清楚。从花生中克隆了１３个ＧＰＡＴ基因，编码含有４个酰基转移酶保守结构域的蛋白；同时，运用酵母遗传互补体系对基因功能进行了鉴定。在该体系中，酵母双突变体菌株ＺＡＦＵ１（ｇａｔ１／ｇａｔ２）因缺少ＧＰＡＴ而不ΔΔ能在特定的葡萄糖培养基上生长。结果表明，ＡｈＧＰＡＴ１／２／３／６／９与空白载体一样，其导入并不能恢复酵母双突变体ＺＡＦＵ１在葡萄糖中的生长缺陷，而ＡｈＧＰＡＴ５Ｂ、ＡｈＧＰＡＴ７Ａ／Ｂ的导入能恢复酵母双突变体ＺＡＦＵ１在葡萄糖中的生长缺陷，说明上述３个基因具有酰基转移酶活性，从而为进一步研究花生油脂的合成代谢调控提供了参考。　　关键词：花生；３－磷酸甘油酰基转移酶（ＧＰＡＴ）；遗传互补；酵母双突变体菌株

　　中图分类号：Ｓ５６５．２０１　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１９）２２－００５６－０５

　　油脂是高等植物的主要能量储存形式，可为植物的种子萌发、花粉发育和有性生殖等提供能量，对于植物的生长发育

１］至关重要［。植物油可为人类提供能量和营养，同时也是重２］

。我国的花生（Ａｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａ）总产量、单要的工业原料［

５－６］

ｎ－１、ｓｎ－２、ｓｎ－３位而生成［。目前，关于甘油脂合成的ｓ

前２步酰化反应的酶，特别是第１步酰化反应的酶知之甚少。研究者在拟南芥、油菜、水稻和向日葵等多种植物中已成功克

７］

ＰＡＴ基因［，但普遍认为，除了隆了多个编码酰基转移酶的Ｇ

位面积产量和出口量一直位居我国油料作物之首，在我国油脂供应、出口创税和国民经济发展中占有举足轻重的地位，但

３－４］

是花生油脂的合成机制目前尚不清楚［。

ＡＴＳ１，只有ＧＰＡＴ９直接参与甘油脂的合成，其他ＧＰＡＴ是否

８－１０］

参与甘油脂合成并不清楚［。已有研究者从花生中克隆

了部分ＧＰＡＴ基因，并对其表达特性进行了分析，但是关于花

１１－１２］

ＰＡＴ酶的特性尚无相关报道［。本研究从山花１５中生Ｇ

植物油的主要成分是三酰甘油（ＴＡＧ），由３－磷酸甘油酰基转移酶（ＧＰＡＴ）、溶血磷脂酸酰基转移酶（ＬＰＡＡＴ）和二ＤＧＡＴ）依次催化脂肪酸链掺入甘油骨架酰甘油酰基转移酶（

收稿日期：２０１９－０４－２６

基金项目：国家重点研发计划（编号：２０１８ＹＦＤ１０００９０６－３）。１９９３—），女，山东青岛人，硕士研究生，主要从事作者简介：姜　竹（ｅｌ：（０５７１）６１１００１６２；Ｅ－ｍａｉｌ：２８６２４４６５８７＠植物脂类代谢研究。Ｔｑｑ．ｃｏｍ。

通信作者：刘宏波，博士，副教授，主要从事植物油脂代谢与生理生化研究。Ｔｅｌ：（０５７１）６１１００１６２；Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｂｌｉｕ＠ｚａｆｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。［７］潘汝谦，关铭芳，徐大高，等．警惕花生黑腐病菌的入侵［Ｊ］．植

物保护，２０１１，３７（１）：１６４－１６５．

［８］潘汝谦，关铭芳，徐大高，等．花生黑腐病菌的生物学特性［Ｊ］．

华中农业大学学报，２０１１，３０（６）：７０１－７０６．

［９］蓝国兵，何自福，佘小漫，等．广东花生主要品种对黑腐病菌的抗

性水平鉴定［Ｊ］．生物安全学报，２０１６，２５（３）：２１４－２１７．［１０］陈相永，陈捷胤，肖红利，等．植物病原真菌寄生性与分泌蛋白

ＡＺｙｍｅｓ的比较分析［Ｊ］．植物病理学报，２０１４，４４（２）：组Ｃ１６３－１７２．　

［１１］ｖａｎｄｅｎＢｒｉｎｋＪ，ｄｅＶｒｉｅｓＲＰ．Ｆｕｎｇａｌｅｎｚｙｍｅｓｅｔｓｆｏｒｐｌａｎｔ

ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｐｐｌｉｅｄｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１１，９１（６）：１４７７．

［１２］ＬｏｍｂａｒｄＶ，ＧｏｌａｃｏｎｄａＲａｍｕｌｕＨ，ＤｒｕｌａＥ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅ

ＣＡＺｙ）ｉｎ２０１３［Ｊ］．ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ－ａｃｔｉｖｅｅｎｚｙｍｅｓｄａｔａｂａｓｅ（ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１４，４２（１）：４９０－４９５．

［１３］ＣａｎｔａｒｅｌＢＬ，ＣｏｕｔｉｎｈｏＰＭ，ＲａｎｃｕｒｅｌＣ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ－

３个３－磷酸甘油酰基转移酶基因，并用酵母遗传互分离了１

补体系对上述基因进行了功能鉴定，发现ＡｈＧＰＡＴ１／２／３／６／９不能恢复酵母双突变体ＺＡＦＵ１在葡萄糖中的生长，ＡｈＧＰＡＴ５Ｂ、ＡｈＧＰＡＴ７Ａ／Ｂ能恢复酵母双突变体ＺＡＦＵ１在葡萄糖中的生长，说明上述３个基因具有酰基转移酶活性。１　材料与方法１．１　试验材料

［１３］花生品种山花１５、酵母菌株ＺＡＦＵ１、大肠杆菌菌株

櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄ａｃｔｉｖｅｅｎｚｙｍｅｓｄａｔａｂａｓｅ（ＣＡＺｙ）：ａｎｅｘｐｅｒｔｒｅｓｏｕｒｃｅｆｏｒｇｌｙｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ［Ｊ］．ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓｅａｒｃｈ，２００９，３７：２３３－２３８．［１４］ＰａｒｋＢＨ，ＫａｒｐｉｎｅｔｓＴＶ，ＳｙｅｄＭＨ，ｅｔａｌ．ＣＡＺｙｍｅｓａｎａｌｙｓｉｓｔｏｏｌｋｉｔ

（ＣＡＴ）：ｗｅｂｓｅｒｖｉｃｅｆｏｒｓｅａｒｃｈｉｎｇａｎｄａｎａｌｙｚｉｎｇｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ－ａｃｔｉｖｅｅｎｚｙｍｅｓｉｎａｎｅｗｌｙｓｅｑｕｅｎｃｅｄｏｒｇａｎｉｓｍｕｓｉｎｇＣＡＺｙｄａｔａｂａｓｅ［Ｊ］．Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１０，２０（１２）：１５７４－１５８４．

［１５］韩长志．全基因组预测希金斯炭疽菌中碳水化合物酶类蛋白

Ｊ］．江苏农业科学，２０１７，４５（２）：２４－２８．［

［１６］韩长志，许　僖．黏绿木霉Ｇｖ２９Ｇ８的碳水化合物活性酶类蛋白预

测及遗传关系分析［Ｊ］．华中农业大学学报，２０１７，３６（５）：３９－４４．［１７］韩长志．基于全基因组测序的禾谷炭疽菌中碳水化合物酶类蛋

白预测［Ｊ］．河南师范大学学报（自然科学版），２０１６，４４（４）：１１８－１２４．　

［１８］ＺｈａｏＺＴ，ＬｉｕＨＱ，ＷａｎｇＣＦ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｆｕｎｇａｌ

ｇｅｎｏｍｅｓｒｅｖｅａｌｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｌａｎｔｃｅｌｌｗａｌｌｄｅｇｒａｄｉｎｇｃａｐａｃｉｔｙｉｎｆｕｎｇｉ［Ｊ］．ＢＭＣＧｅｎｏｍｉｃｓ，２０１３，１４（１）：１－１５．