栩菌鞭毛的染色方法日C勒兹柯娃鞭毛的性肤对确定袖菌归属于某一个种方面来搏,具有很大的意义,而至今在已握为人仍所提到的鞭毛染色方法中,没有一个方法可以韶为是完全满意的和能在一切条件下保靓成功的。我们从事鞭毛染色工作多年,在这方面果积了某些握竣,这些径毅我们露为是可以交流的。在栩菌鞭毛染色的时候,染色的成功在组大程度上在于遵循静多袖小的条件,而这些条件涌常并不在手册中指出。首先必厦使用新鲜培养的菌种,这种新蟠养的菌种用接种针接到盛有足量(05毫升者社)蒸砌水的肉汤蛋白膝瑰脂裁管的蒸姻水中—释。接种针上的菌种小心的洗到盛于孩裁管底上的蒸馏水中,之后再以熊有这种含菌蒸姻水的接种针就在孩款管的玻脂斜面上进行划钱接种。粗过一盆夜,重复操作一次,就是用接种针取上述裁管底部的含菌蒸翻水和在接近蒸馏水液面附近的琼脂上生是的少并菌落薄层,将其接种到有肉汤蛋白腺遭脂培养荃的新裁管底部蒸绪水中,或者如果这类菌种不生畏在肉踢蛋白旅绷旨培养基的括就接种到其他绷旨培养基上,盛干拭管内的蒸馏水应不少于05毫升,如较少RJI可加添灭菌水。粗三盛夜,以同样的方法将同样的菌种量(即尽熊有含菌蒸馏水的接种针取靠近蒸榴水液面附近的琼脂划珑上生畏的少静菌落薄层)接种到含有灭菌水的吠管中(灭菌水的盆不限,但皮保有一定高度的水注)。之后将拭管暇于同样温度的定温箱内,接种好的培养物就在这种情况下繁有。舰过36小时到48小时,着手制作标本,在培养翻菌的裁管中落慢地伸进和取出接种断,熊取菌液表面的液体,并将其滴到艳对净沽去油的载玻片上、液滴应孩在载玻片上四面淌开,不允豁涂擦液滴,在空气中凉干,并不采用固定的方法。当标本准备就精后,用吕佛勒氏媒染剂(Lfofer`。二。rdatn)浸染10分镜,小合照麒,媒染剂不能使千。在最后三分撞,或有时在十分镜时简到后立即使标本加热至出现蒸汽,将标本置于灯头上高处,但同时应加刁闷徽袱,务崔媒染剂不煮沸和不使供千。之后要小心的冲洗标本,在预先盛于杯子的水中,暇玻片放入和取出重复几次。然后着手染色,将总氏石碳酸复杠滴到被水澜湿的标本上,标本为碳酸复杠浸染时简不少于5一7分邃。以同样的方法在盛水的杯子里洗去染料。由水中取出载玻片,并小心的用滚概擦干载玻片的边椽及其反面,这样做为了不致揖害标本,在一片载玻片上可以做2一3个标本。巳染色的标本在空气中凉干,用油镜观察接近标本的边椽,用照相作为取得成果的征明(晃图1一3),桔渝1在栩菌鞭毛染色时,为了要取得良好的桔果必疽遵守所指出的条件。2所介招的方法握莫斯科大学生物土维教研粗掇查极常取得良好的桔果。〔附必要的菜剂配方〕(1)右氏复杠(中yKeHH以HIJ只):以10毫升硷性复杠鲍和酒精溶液加到10毫升5%无色石碳酸溶液中。为了取得无色的石碳酸,把市上出瞥的玫瑰色石碳酸倒在阜兹境瓶(Wjitr:nas)k里蒸绷,在灯头_E小心加热至沸,最好要用新解配制的染料进行染色。(2)吕佛勒氏媒染剂(Il-PoTPa.aJle巾巾涯ePa):把1之克翠宁酸在加热的条件下溶人84毫升的蒸阉水里,再加添30毫升的硫酸亚叙饱和溶液(溶液的颇色应孩是糠色的)和6毫升硷性复杠鲍和酒精溶液。将配好的混合液过溥到带有毛玻璃盖的暗色玻璃瓶里,玻璃瓶在暗处放置5一6天,溶液在使用前重新过泥。媒染剂可以保存六个月。(3)载玻片的去油处理:裁玻片以一小片洗衣皂涂擦,使略为光滑,之后用干净的楷布擦净。裁玻片的合理去油,在很大程度上保靓了鞭毛染色的成功。袖菌悬液的液滴沿着巳握很好去油的载玻片四散分布成一薄层。要掇查的袖菌袖胞均匀的分布开来,紧贴在载玻片上,保持鞭毛不被揖坏。相反,液滴在去油不良的裁玻片上滚劝的情况下,柔弱的鞭毛被同时形成的液流冲坏,并常常从栩菌栩胞体上断裂下来。3