反复呼吸道感染患儿血清总IgE和特异性IgE水平
作者:孙境 尹文艳 蒋红雨 朱晓萍 作者单位:贵阳市云岩区医院 儿科, 贵州 贵阳 550003 【摘要】 目的: 测定反复呼吸道感染(RRTI)患儿血清总IgE(tIgE)水平、特异性IgE(sIgE)阳性率, 探讨RRTI与血清tIgE、sIgE的关系。方法: RRTI患儿40例,对照组健康儿童35例,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清tIgE水平,欧蒙印迹法检测血清吸入与食物组抗原sIgE抗体阳性率。结果: (1)RRTI组血清tIgE水平比对照组显著升高(P<0.01);(2)RRTI组血清吸入与食物抗原sIgE类抗体阳性率比对照组明显升高(P<0.01);(3)RRTI组血清sIgE类抗体以抗尘螨组合﹑猫毛、屋尘抗体多见,而食物组sIgE类抗体则以抗海鱼和淡水鱼抗体多见;(4)sIgE阳性率在tIgE水平升高与否的两组间差异不具显著性,血清tIgE水平升高率在sIgE阳性与否的两组间差异亦不具显著性(P>0.05 )。结论: RRTI可能与过敏体质有关,tIgE水平的升高或降低与sIgE阳性率高低并不完全一致。 【关键词】 呼吸道感染儿童 免疫球蛋白 抗原
反复呼吸道感染(Recurrent respiratory tract infection, 简称RRTI)是由多种病因引起的一组反复发作的呼吸道疾病的总称,是小儿时期的常见病、多发病,严重影响了患儿的生长发育,给社会与家庭带来一定负担。目前普遍认为免疫功能紊乱与RRTI关系密切,但对总IgE﹙total specific immunoglobulin E, tIgE﹚、特异性IgE( specific immunoglobulin E, sIgE)与RRTI的关系研究甚少。2006年3月~2006年12月对40例RRTI患儿血清tIgE水平及sIgE阳性率进行测定,探讨tIgE及sIgE在RRTI发病中的作用,为临床预防及治疗RRTI 提供一定的理论依据。 1 资料与方法 1.1 对象
RRTI组患儿40例,诊断标准参照文献[1]。男26例,女14例,平均(3.68±1.47)岁。排除肺、气管及心脏先天性畸形、胃食管反流﹑贫血﹑佝偻病、营养不良、肿瘤等引起的呼吸道感染,排除近3个月内使用过免疫增强剂及免疫抑制剂者。对照组健康儿童35例,男19例,女16例, 平均(3.80±1.16)岁,两组年龄比较差异无显著性(P>0.05)。 1.2 主要的试剂
tIgE检测试剂盒﹙美国Chemux Biosciences公司﹚和sIgE检测试剂盒(吸入和食物变应原组合,德国欧蒙公司)。 1.3 标本采集
采集空腹静脉血5 ml,置于不抗凝无菌试管中,血凝后离心,2 000 r/min×5 min,收集血清,置于-40 ℃冰箱中冻存待检。 1.4 tIgE的检测
严格按试剂盒说明书操作。加待测血清(复孔)及缓冲液,混匀10 s,室温避光温育30 min,洗板5次,加酶反应物150 μl,混匀5 s,室温避光温育30 min,洗板5次,加入100 μl TMB底物,混匀5 s,室温避光温育20 min,加入100 μl的终止液,混匀30 s,在450 nm下测定OD值,绘制标准曲线,计算出每个样品的IgE值。 1.5 sIgE的检测
按试剂盒说明书操作。加入1.0 ml缓冲液,取出变应原提取物包被的膜条置于温育槽中,温育5 min(室温), 然后加入1.0 ml未稀释的血清标本, 温育60 min﹙缓冲液洗膜条3次×5 min﹚,加入1.0 ml酶结合物,温育60 min﹙缓冲液洗膜条3次×5 min﹚,加入1.0 ml
底物液﹙温育10 min,蒸馏水洗膜条3次×1 min﹚。结果判断以出现深色条带++及以上者为阳性。
1.6 统计学处理 以对照组(x±2SD)为95%的可信区间,低于或高于此标准判断为异常。应用SPSS 11.5统计软件包进行处理,计量资料采用成组设计t检验、计数资料采用非参数检验及四格表Fisher确切概率法,P<0.05有显著性差异。 2 结果
2.1 tIgE水平比较
RRTI组血清IgE为(90.765±79.580)IU/ml,对照组为(40.960±35.484)IU/ml,两组比较差异有显著性(P<0.01)。RRTI组血清tIgE升高者占32.5%(13/40),而对照组升高者仅占5%(1/20),差异有显著性﹙P<0.05) 。 2.2 RRTI组sIgE阳性检出率及过敏原分析
2.2.1 sIgE阳性检出率 RRTI组血清20种吸入与食物sIgE阳性率75%,对照组13.33%,差异有显著性意义﹙P<0.01)。
2.2.2 RRTI组抗原sIgE类抗体分析
RRTI组血清吸入组抗原IgE类抗体以尘螨组合﹑猫毛(阳性率均为25% )、屋尘(阳性率为20.83% )多见,而食物组抗原IgE类抗体则以海鱼和淡水鱼(阳性率均为20.83% )多见。24例RRTI患儿中有9例两种及两种以上抗原特异性IgE类抗体呈阳性, 见表1。 2.2.3 RRTI组对吸入与食物抗原敏感程度
按试剂盒说明书, 显色条带分为0、+、++及+++四个等级,++及以上定为有临床意义。24例病人,每条膜条包被20种抗原,共有480个抗原次。同理,15例对照,有300个抗原次,RRTI组对吸入与食物抗原过敏程度比对照组严重,差异有显著性意义(P<0.001),见表2。 2.3 血清tIgE与sIgE的相关性
在检测对象中,有24人(RRTI患儿和对照组儿童)同时检测了tIgE和sIgE 。总IgE 以对照组111.93 U/ml为标准,分为升高组和正常组,其sIgE阳性率分别为62.5%(5/8)和81.3 %(13/16),差异不具显著性。以sIgE阳性与否分组,其tIgE水平升高者分别为27.8%(5/18)和50%(3/6),差异亦不具显著性。表1 RRTI患儿血清sIgE类抗体检测结果表2 RRTI患儿对吸入与食物抗原过敏程度 3 讨论
RRTI的病因与小儿营养、免疫等内部因素及病原生物、环境等外部因素有关, 机体免疫功能的高低在RRTI的发病中也具有重要作用。巨噬细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞都参与IgE的合成[2],它是引起I型变态反应的主要抗体 。控制tIgE的基因与气道高反应性的基因靠近, 表现常染色体显性遗传, 同时也与气道高反应相关[3],而气道高反应性易导致呼吸道反复感染。有研究表明,RRTI患儿tIgE 水平和sIgE阳性率均高于对照组,RRTI患儿有形成sIgE的基础,它引起的气道炎症与随后发生的哮喘关系密切[4,5]。本实验研究表明,RRTI患儿血清中tIgE水平明显升高、吸入与食物组抗原sIgE阳性率也明显增高,以尘螨组合﹑猫毛、屋尘以及海鱼和淡水鱼多见;另外,RRTI组对吸入与食物组抗原敏感的程度也明显比对照组严重。本实验研究还表明,儿童血清中tIgE水平升高者,sIgE阳性率为62.5%;tIgE水平正常者,sIgE阳性率 81.3%,但两者差异不具显著性;血清sIgE 阳性者中,仅有27.8%的小儿血清tIgE 水平升高;血清sIgE阴性儿童中,有50%的小儿血清tIgE升高,两者之间差异亦不具显著性。 tIgE水平增高与sIgE的阳性反应不呈一致性, 这与国内相关报
道不完全一致,可能与本次检测病例数过少,或检测的抗原特异性抗体种类有关。 但也提示单纯tIgE水平升高并不能确诊为变态反应性疾病, tIgE水平不高也不能排除存在着特异性过敏,因可能是引起这部分RRTI患儿过敏的过敏原为单一种类或少数几种, 过敏程度很低,虽然sIgE为阳性,但sIgE 量低,不足以影响tIgE水平。故同时检测tIgE和sIgE尤为重要。 IgE的合成受许多因素调控,遗传因素、环境因素、T淋巴细胞、B淋巴细胞、CD86及多种细胞因子均影响IgE的合成。文献报道tIgE的升高与Tbet mRNA的表达低下有关[6,7], Tbet可能间接影响tIgE水平。朱晓萍等[8]的实验证实,IL4 和IL13 能增加哮喘患者B细胞上CD86表达,从而促进更多的IgE 产生,B细胞CD86表达与TH2细胞因子产生形成一个正反馈。有实验证实,纯化的CD86+B细胞较纯化的CD86-B细胞产生较多的IgE ,B细胞CD86表达百分率与血浆总IgE水平在哮喘组和对照组均呈显著正相关,这说明B细胞上CD86分子的表达有助于IgE的产生[9]。IL6可促进B 细胞分化且辅助TH2细胞产生IL4,而IL4在IgE 的产生中起关键作用,并可促进IgE合成分泌亢进。由此可见,T淋巴细胞、B淋巴细胞、CD86及多种细胞因子相互作用,形成免疫网络影响IgE的合成。本研究证明RRTI患儿tIgE水平及抗原sIgE阳性率增高,tIgE水平升高或﹙和﹚sIgE阳性可能都是RRTI发病的重要原因之一, RRTI患儿在生活中应尽量避免接触致敏原。
晋升网(http://www.js120.net)致力于成为医务工作者晋升职称心灵导师;是目前国内收录医学期刊、医学杂志最多最权威的医学学术平台;提供免费医学期刊在线阅读;网罗和甄选海量优秀医学论文检索,独立研发医学在线资源分享库和医学在线模拟考试库;整合刊类、标题、关键词检索及全文检索,并独家研发刊社管理和刊社加盟系统、在线投稿、在线查稿、在线阅读、远程审稿、在线下载等系统;聚刊社力量,建服务平台,让晋升网通过“专业”走入每一个医务人员的身边是我们不懈的追求目标。 【参考文献】
[1]胡仪吉.反复呼吸道感染的诊断标准[J].中华儿科杂志,1988(1):40-41.
[2]李国华,孟 冰,马永信,等.哮喘患者SIgE 与TIgE 的关系分析[J].医学检验与临床,2006(5):58-59.
[3]姚欣, 段凯生. 哮喘基因研究进展[J].国外医学内科分册,1998(5) : 204–206.
[4]李建平.哮喘及反复呼吸道感染患儿T淋巴细胞亚群和IgE 的测定与分析[J].中国厂矿医学,2005(6):505–506.
[5]陈德晖,孙宝清,关镜明等.血清SIgE 和ECP 在反复呼吸道感染患儿检测的临床意义[J].中国当代儿科杂志,2001(5):541–542.
[6]QU Shenhong ,L I Tianying.Expression of Tbet and its relation with IgE and eosinophile cationic protein in patients with allegic rhinitis.Chin J Otorhinolaryngol Head Neck Surg[J].2005(12):908–911.
[7]Szabo SJ, Kim ST, Costa GL, et al.A novel transcription factor, Tbet, directs Th1 lingeade commitment1[J].Cell, 2000(100):6552-6691.
[8]朱晓萍,杨锡强,符州,等.哮喘患儿外周血单个核细胞IL-13表达与血浆总IgE的相关性[J].重庆医学,2003(4):391-393.
[9]朱晓萍,杨锡强,符州,等.哮喘患儿外周血单个核细胞表面CD86 分子的表达[J]. 中华微生物学和免疫学杂志,2003,(7):560-561.
申明:本论文版权归原刊发杂志社所有,我们转载的目的是用于 学术交流与讨论,仅供参考不构成任何学术建议。
因篇幅问题不能全部显示,请点此查看更多更全内容