维普资讯 http://www.cqvip.com 安徽医科大学学报Ａｃｔａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ Ａｎｈｕｉ ２００７ Ｄｅｃ；４２（６） ·７０５· 双表型急性白血病的免疫分型 宣柳 ，沈佐君‘，李筱青 主题词 白血病；免疫表型分型；流式细胞术 中图分类号Ｒ ７３３．７１ 文献标识码Ａ文章编号１０００—１４９２（２００７）０６—０７０５—０２ 双表型急性白血病（ｂｉｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ ａｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉ— ａ，ＢＡＬ）指急性白血病（ａｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＡＬ）中髓系 和淋巴系均受累的一个亚型。常分为双表型、双系 列、双克隆型，其中双表型、双系列较为常见。双表 型指同一白血病细胞群同时表达髓系和淋巴系标 记，双系列指存在两种或两种以上的细胞亚群，分别 表达淋系和髓系标记。多数学者认为无必要区分双 表型和双系列型，统称为双表型细胞即可。由于 ＢＡＬ发病率低，国内尚缺乏系统研究ＢＡＬ的报道， 笔者对２６例ＢＡＬ患者，利用流式细胞术进行了全 面的免疫分型，现报道如下。 １材料与方法 １．１病例选择２００２年２月～２００６年８月，安徽 医科大学附属省立医院收治ＡＬ ４４８例，各例均于治 疗前抽取骨髓进行细胞形态学／细胞化学、免疫学和 细胞遗传学检测。４４８例ＡＬ经ＭＩＣ分型，最终确 诊ＢＡＬ者２６例（占ＡＬ ５．８％），男ｌ８例，女８例，年 龄ｌ６～４９岁，中位年龄２３岁。 １．２临床资料２６例均有发热，齿龈出血、鼻出血 ｌ３例，肝、脾、浅表淋巴结肿大ｌ７例，骨痛７例，头 痛呕吐５例。骨髓瑞氏染色见形态明显不一致的两 类白血病细胞、诊断为急性混合细胞白血病１１例， 急性髓系白血病９例（Ｍ１ ２例、Ｍ２ａ ５例、Ｍ５ ２例）， 急性淋巴细胞白血病６例。血红蛋白＞１００ ｇ／Ｌ ４ 例，６０～１００ ｇ／Ｌ １２例，＜６０ ｇ／Ｌ １０例；ＷＢＣ（４．０～ １０．０）×１０ ／Ｌ ４例，＞１．０×１０ ／Ｌ ｌ８例，＜４．０× １０ ／Ｌ ４例；外周血找见幼稚细胞１６例；血小板≤ １．０×１０“／Ｌ ｌ４例；Ｄ１Ｃ筛选指标阳性７例。 １．３试剂和材料溶血剂（Ｏｐｔｉｌｙｓｅ Ｃ）、改变细胞 ２００７—１０—２６接收 作者单位： 安徽医科大学附属省立医院安徽省ｌ临床检验中心，合肥 ２３０００１ 安徽省医学科学研究所，合肥２３００６１ 作者简介：宣柳，男，硕士，助理研究员； 沈佐君，男，博士，教授，硕士生导师，责任作者，Ｅ－ｍａｉｌ： ｚｕｏｊｕｎｓｈｅｎ＠１６３．ｃｏｒｎ 膜渗透性试剂盒（Ｉｎｔｒａ Ｐｒｅｐ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｒｅａ— ｇｅｎｔ）及全部单抗均购自美国Ｂｅｃｋｍａｎ—ＣｏＵＬｔｅｒ公 司。所用抗体中髓系ＣＤ１３、ＣＤ３３、ＭＰＯ；Ｂ细胞系 ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ｃｙＣＤ２２；Ｔ细胞系ＣＤ７、ｃｙＣＤ３、 ＣＤ４、ＣＤ８。无系列特异性抗体为ＣＤ３４。流式细胞 仪器型号为Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｅｐｉｃｓ ＸＩ—Ｍｃｌ，激发光为４８８ ｎｍ 氩离子，ＦＩＴＣ滤光片５２５ ｎｍ，ＰＥ滤光片５７５ ｎｍ。 １．４方法每管中加入荧光标记抗体和ＥＤＴＡ抗 凝的骨髓（含ｌ０ 个有核细胞），个别患者外周血幼 稚细胞＞３０％时采用外周血。室温，避光孵育 １５ｍｉｎ加溶血素５０００，Ｌ，室温避光孵育１０ ｍｉｎ，离 心，ＰＢＳ洗涤。胞浆抗原ＭＰＯ、ＣｙＣＤ３、ＣｙＣＤ２２的检 测需再加破膜剂，室温下１０ ｍｉｎ，离心，ＰＢＳ洗涤，加 相应的荧光标记抗体，室温下孵育３０ ｍｉｎ，ＰＢＳ洗 涤，所有样本最终加入５００ ｌ ＰＢＳ重悬，上流式细 胞仪检测。检测前常规进行光２流路质控检测及双 色荧光补偿，设定被测细胞群（即用ＣＤ４５ ｄｉｍ设 门）每次计数ｌ０ 个细胞以上。 １．５免疫分型判断标准 双表型急性白血病诊断 按照ＥＧＩＬ标准…，本组采用积分制，具体积分标准 见文献［２］。双标记时，同一细胞上的异系列抗体 ＞１０％，ＭＰＯ＞３％，其他系列单个抗体＞３０％开始 按积分标准计分。双表型要求两个或两个以上系列 ＞２分 。 １．６统计学处理结果采用百分率表示，各组间差 异比较用四格表的确切概率法。 ２结果 ２．１抗原表达２６例ＢＡＬ中以Ｂ淋巴细胞和髓 系混合表达最多（约占６５．３％），其次Ｔ、Ｂ、髓细胞 系共表达（２３．１％），Ｔ淋巴细胞和髓系为１１．６％。 免疫分型结果见表１。 ２．２ ＣＤ３４与预后的相关性分析本组中２０例有 完整临床资料。ＣＤ３４ １５例，其中１例完全缓解， 缓解率为１／１５，ＣＤ３４ ５例，其中完全缓解４例（４／ ５）。其中完全缓解指临床无白血病浸润所致症状 和体征，骨髓中原始细胞＜５％，红细胞及巨核细胞 系正常，且血红蛋白１００ ｇ／Ｌ（男性）或＞１９０ ｇ／Ｌ（女 性及儿童），中性粒细胞绝对值＞１．５×１０ ／Ｌ，血小 板≥１００×１０ ／Ｌ。外周血中未发现白血病细胞。 维普资讯 http://www.cqvip.com ·７０６· 安徽医科大学学报Ａｃｔａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ Ａｎｈｕｉ ２００７ Ｄｅｃ；４２（６） 顽固性儿童分泌性中耳炎的手术治疗 朱永军 ，邱建新 ，汪银凤 ，刘业海 ，方主题词科学 平 中耳炎，伴渗出液／药物疗法；中耳炎，伴渗出液／外 Ｒ ７６４．２１０．５；Ｒ ７６４．２１０．５３ 起小儿听力下降的最常见的原因之一。对于该病手 术治疗的方式，文献报道¨ 不一致。为探讨有效 的手术治疗方式，我们将２０００年１月～２００７年１月 在安徽医科大学附属医院经保守治疗无效、病程超 过３个月、鼓室导抗图为Ｂ型或Ｃ型的儿童分泌性 中图分类号文献标识码Ａ文章编号１０００—１４９２（２００７）０６—０７０６—０３ 分泌性中耳炎是以中耳积液及听力下降为主要 特征的非化脓性中耳炎性疾病，小儿发病率高，是引 ２００７—０７—２０接收 中耳炎７３例，分成两组，分别进行腺样体切除联合 鼓膜置管术＋药物治疗和药物治疗＋单纯腺样体切 除术，术后辅以药物治疗，对治疗效果进行随访，现 报道如下。 １材料与方法 作者单位： 安徽医科大学第一附属医院耳鼻咽喉一头颈外科，合肥 ２３ｏｏ２２ 安徽医科大学附属省立医院耳鼻喉一头颈外科，合肥 ２３０ｏｏｌ 作者简介：朱永军，男。硕士研究生； 邱建新，男，教授，主任医师，责任作者，Ｅ—ｍａｉｌ：ＱｉｕＪｉａｎｘｉｎ ＠ｈｏｔｍａｉＩ＿１２０１１１ １．１病例资料经临床确诊为分泌性中耳炎，经保 守治疗，麻黄素滴鼻、抗生素、强的松、咽鼓管吹张按 摩等治疗无效或治疗后复发，病程超过３个月，声阻 裹１混合型急性白血病抗原表达情况［％（例）］ ＣＤ３４ 患者预后与ＣＤ３４一患者相比较差异有显著 性（Ｐ＜０．０５）。 ３讨论 多系列抗原阳性存在情况。同时我们发现ＣＤ３４是 预后相关的一项指标。且与治疗结果呈负相关。 Ｋｅｌｌｉｃｋ ｅｔ ａｌ［５ 发现高表达ＣＤ３４患者，均出现染色 我们发现Ｂ和髓系白血病常伴ＣＤ７、ＣＤ４阳 性，Ｔ和髓系白血病常伴ＣＤ１０、ＣＤ１９阳性，但异系 体核型异常，同时过度表达Ｐ糖蛋白。提示对ＢＡＬ 对常规化疗不敏感，也提示ＣＤ３４为预后不良的指 标。 列抗原积分总和＜２分。进一步具体分析抗原表达 情况，胞浆内ＭＰＯ、ＣｙＣＤ３、ＣｙＣＤ２２在免疫分型中 具有重要的作用。现认为淋巴中ＣｙＣＤ３、ＣｙＣＤ２２ 先于膜表达，且特异性强，至今尚未发现系列细胞的 交叉反应，对于鉴别早期Ｔ、Ｂ淋巴细胞白血病有重 要意义。 本组ＢＡＬ中Ｂ系、髓系共表达约占６８．３％，与 文献６９．５％结果基本一致，在３种ＢＡＬ中，ＣＤ３４阳 性率均很高，（Ｔ、Ｂ、髓系为８３．５％，Ｂ、髓系为 ７６．６％，Ｔ、髓系为６６．６％），且ＣＤ３４的表达与ＢＡＬ 免疫分型无相关性，这与Ｌｅｇｒａｎｄ ｅｔ ａｌ＿４ 报道结果相 致。提示ＢＡＬ是起源较早的原始阶段的造血干 细胞，恶性干细胞生长，和分化异常使白血病细胞具 有多系列的表现型和基因型，从而在免疫学上呈现 一参考文献 ［１］Ｂｅｎｅ Ｍ Ｃ，Ｃａｓｔｏｌｄｉ Ｇ，Ｋｎａｐｐ Ｗ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｐｏｓａｌｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏ— ｌｏｇｉｃａｌ ｃｌａｓｓｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ【Ｊ］．Ｌｅｕｋｅｍｉａ，１９９５，９ （１Ｏ）：１７８３—６． ［２］张之南，沈娣．血液病诊断及疗效标准【Ｍ］．２版．北京：科 学出版社，１９９８：１８８—２０８． ［３］ 翟志敏，何晓东，戴海明，等．１ｌ２例成人急性白血病免疫分型 ［Ｊ］．中华血液学杂志，２００２，ｌｌ（１２）：６３３—５． 【４］Ｌｅｇｒａｎｄ Ｏ，Ｐｅｒｒｏｔ Ｊ Ｙ，Ｓｉｍｏｎｉｎ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ａｄｕｌｔ ｂｉｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ ａｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ：ａＩｌ ｅｎｔｉｔｙ ｗｉｔｈ ｐＯＯｌ＂ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｕｎ— ｆａｖｏｕｒａｂｌｅ ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］． Ｈａｅｍａｔｏｌ，１９９８，１００（４）：１４７—５１． ［５］ＫｉＵｉｃｋ Ｓ，Ｍａｔｕｔｅｓ Ｅ，Ｐｏｗｌｅｓ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｏｕｔｃｏｍｅ ｏｆ ｂｉｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ ａ— ｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ［Ｊ］．Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ，１９９９，８４（３）：６９９—７０６．